摘要: 采用高效液相色谱法(hplc)测定3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度，采用waters t3 (250 × 4.6 5 μm)色谱柱；流动相甲醇：水(0.02 mol/l磷酸二氢钾溶液) = 20:80 (v/v)，检测波长214 nm，流速0.8 ml/min。结果表明，3-氨基-1,2,4-三氮唑纯度检测线性关系良好，回收率为100.16%。方法准确、简单可行，重复性好，适用于3-氨基-1,2,4-三氮唑工业化生产的质量控制。
abstract:
hplc was used to determine the purity of 3-amino-1,2,4-triazole. waters t3 (250 × 4.6 5 μm) chromatographic column and mobile phase methanol:water (0.02 mol/l potassium dihydrogen phosphate solution) = 20:80 (v/v) were used, with detection wavelength 214 nm, flow rate 0.8 ml/min. the results showed that the purity of 3-amino-1,2,4-triazole was linear and the recovery was 100.16. the method is accurate, simple, feasible and reproducible. it is suitable for the quality control of 3-amino-1,2,4-triazole in industrial production.
1. 引言
3-氨基-1h-1,2,4-三氮唑(ata) (结构式：
)是由氨基胍碳酸盐和甲酸反应制得，
3-氨基-1h-1,2,4-三氮唑(ata)作为一种应用广泛的有机中间体，主要用于化工、农药、医药、染料等行业，还可以直接用作除草剂、润滑剂以及金属缓蚀剂等 [1] 。目前，有关3-氨基-1h-1,2,4-三氮唑含量检测的液相方法尚未报道，hplc法具有分离效率高、选择性好、检测灵敏度高、适用范围广等特点 [2] [3] 。我们进行大量摸索、研究，选用波长为214 nm，加大流动相中的水相。实验结果表明，该方法的线性范围、准确度、精密度都较好，从而为3-氨基-1h-1,2,4-三氮唑含量测定提供了一个重要参考。
2. 实验部分
2.1. 仪器与试剂
高效液相色谱仪(日本岛津公司) lc
-10a
，色谱柱：waters t3 4.6 × 250 mm，5 μm不锈钢柱，dszo60型超声波清洗器，超纯水，甲醇，乙腈均为色谱纯，甲酸铵、三氟乙酸、磷酸二氢钾均为分析纯试剂。标准样品(阿拉丁试剂网分析标样，≥99%)，待测样品(本公司)。
2.2. 色谱条件
流动相：甲醇：水 = 20:80
柱温：
40 ℃
检测波长：214 nm
流速：0.8 ml/min
保留时间：3-氨基-1h-1,2,4-三氮唑为3.65 min左右。上述液相色谱条件系典型操作参数，可根据不同仪器特点对给定参数作适当调整，以期获得最佳效果。
2.3. 测定步骤
2.3.1. 标准样品的配制
准确称取0.0100 g (精确至0.0001 g)标准品溶于25 ml容量瓶中，用纯水定容至刻度，摇匀，作为标样备用。
2.3.2. 试样的配制
准确称取0.0100 g (精确至0.0001 g)样品溶于25 ml容量瓶中，用纯水定容至刻度，摇匀，作为待测样备用。
2.3.3. 测定
在上述色谱条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性，按标样、待测样、待测样、标样的顺序进样。ata标样以及待测样的色谱图(图1、图2)。
. spectrogram of standard sample
图1. 标样谱图
. spectrogram of sample to be tested
图2. 待测样谱图
3. 结果和讨论 [4] [5]
3.1. 吸收波长的确定
在190~350 nm波长范围内采用紫外扫描，发现214 nm作为检测波长时，ata及其杂质具有较强的吸收峰，且无其他杂质干扰，最终选定214 nm作为检测波长。
3.2. 流动相和流速的选择
为了确保ata及其杂质可以完全分开，分别选择不同比例和不同ph值的甲醇 0.02 mol/l磷酸二氢钾水溶液、甲醇 水、乙腈 水、乙腈 0.02 mol/l磷酸二氢钾水溶液等作为流动相对待测样进行分离检测，结果表明，当流动相为甲醇：水(0.02 mol/l磷酸二氢钾溶液) = 20:80 (v/v)时，各组分均能得到理想的分离且基线平稳，因此选择甲醇：水(0.02 mol/l磷酸二氢钾溶液) = 20:80 (v/v)作为本法的最佳流动相。流动相在流速0.8 ml/min的条件下，分离较好，无峰展宽和拖尾，且柱压低，安全性好。因此选择此条件。
3.3. 分析方法的线性相关性
称取ata标品，分别配成1.0、0.8、0.6、0.4、0.2 mg/ml的工作液，按上述色谱条件进样，记录峰面积，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。其线性方程为y = 1.91932 × 107x 1.2979 × 106，相关系数为r = 0.9996。
3.4. 精密度实验
精密称取ata标准品，在上述色谱条件下，分别重复测定5次，结果见表1。
. results of precision experiment
表1. 精密度实验结果
由表1可知，ata峰面积的rsd值为1.506%，表明仪器的精密度良好。
3.5. 重现性实验
精密称取同批次样品5份，按待测样溶液制备法制备样品并测定，结果见表2。
. results of reproducibility experiment
表2. 重现实验结果
由表2可知，ata峰面积的rsd值为1.532%，表明本方法重复性良好。
3.6. 稳定性实验
精密称取同批次样品按待测样溶液制备法制备成待测样，分别于0、8、24、48、96 h测定峰面积，结果见表3。
. results of stability experiment
表3. 稳定性实验结果
由表3可知，ata峰面积的rsd值为1.330%，表明本方法稳定性良好。
3.7. 回收率实验
采用加样回收法，精密称取已知含量的样品5份，分别添加一定量的ata标准品，混匀。按1.2步骤制备待测样，分别进样，记录峰面积。计算结果见表4。
. results of recovery experiment
表4. 回收率实验结果
4. 结论
综上所述，采用本方法测定3-氨基-1h-1,2,4-三氮唑含量，具有快速、准确、简便等特点，且精密度、重现性和稳定性均能满足产品检验的要求，是一种实用的分析方法，适用于企业工业化生产的质量控制。